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尼康顯微鏡就是主要用來測(cè)量計(jì)量方面的一類顯微鏡,與一般顯微鏡的不同主要在工作臺(tái)的運(yùn)行精度非常高,配有一些特殊的目鏡,用于平面乃至三維數(shù)據(jù)的測(cè)量。采用物鏡朝上的設(shè)計(jì)以便從標(biāo)本的下方進(jìn)行觀察,因此被廣泛地應(yīng)用于生物醫(yī)藥實(shí)驗(yàn)室,用于查看培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài),熒光蛋白的表達(dá)情況等,為了滿足此領(lǐng)域多樣性的研究手段,需要倒置顯微鏡具備各種觀察方式,實(shí)驗(yàn)室有限的空間需要緊湊的機(jī)身設(shè)計(jì)同時(shí)具備出色的可操控性。
使用尼康顯微鏡進(jìn)行測(cè)量的具體方法:
1、尼康顯微鏡目鏡視度調(diào)節(jié)
進(jìn)行工具顯微鏡目鏡視度調(diào)節(jié)即先進(jìn)行在目鏡視場(chǎng)里能觀察到清晰的刻線像的調(diào)節(jié),如果測(cè)量者在目鏡視場(chǎng)里得不到清晰的刻線影像,應(yīng)調(diào)節(jié)目鏡視度圈,使視度與測(cè)量者視力相適應(yīng),這樣便可得到清晰的米字線。
通過調(diào)焦手輪移動(dòng)中央顯微鏡,在目鏡視場(chǎng)里得到清晰的物體輪廓的像,然后移動(dòng)縱橫向工作臺(tái)進(jìn)行對(duì)線。若測(cè)量者眼睛在目鏡上下、左右晃動(dòng)在視場(chǎng)里沒有發(fā)現(xiàn)物體像和米字線相對(duì)移動(dòng),則說明被測(cè)件正確地成像在米字線分劃板上,這時(shí)即可進(jìn)行測(cè)量。若物體像與米字線有相對(duì)移動(dòng),則說明工具顯微鏡未調(diào)焦好,需進(jìn)一步仔細(xì)調(diào)焦,使物體像和米字線分劃板在同一平面上。
2、對(duì)線(壓線)方法
對(duì)線(壓線)就是用米字線和被測(cè)件影像輪廓邊緣相互重疊,也就是所說的瞄準(zhǔn),對(duì)一臺(tái)具體的工具顯微鏡來說,工具顯微鏡的精度是一定的,要使測(cè)量精度比較高和可靠,很大程度上取決于正確的對(duì)線方法,對(duì)線方法有2種:一種是間隙對(duì)線法,另一種是重疊對(duì)線法。
①間隙對(duì)線法
間隙對(duì)線法適用角度測(cè)量。在工具顯微鏡測(cè)量角度時(shí),任意一條米字線虛線和被測(cè)角度的一邊在視場(chǎng)里相靠時(shí),使米字線虛線和被測(cè)角度之邊緣保持一條狹窄的間隙,測(cè)量者就以這條間隙大小的均勻性來判斷米字線虛線和被測(cè)件影像邊緣對(duì)準(zhǔn)的精確度。
如果不采用上述對(duì)線方法,而直接采用和影像邊緣重疊的方法,則不但使測(cè)量者感到很難對(duì)準(zhǔn),而且會(huì)增加測(cè)量誤差。這時(shí)因?yàn)楸粶y(cè)件的輪廓在視場(chǎng)里的影像不是一條細(xì)線,而是一個(gè)明暗輪廓,同時(shí)米字線的刻線已有一定的寬度。如果把它們重疊起來測(cè)量,勢(shì)必產(chǎn)生較大的對(duì)線誤差,特別是當(dāng)被測(cè)量角度的邊比較短時(shí),這種情況就更加嚴(yán)重。所以工具顯微鏡在角度測(cè)量時(shí)應(yīng)采用間隙對(duì)線法。
②重疊對(duì)線法
如果尼康顯微鏡在長(zhǎng)度測(cè)量時(shí),仍然采用上述間隙對(duì)線法,將會(huì)增加長(zhǎng)度測(cè)量誤差。原因是問隙無法測(cè)量而又包含在被測(cè)長(zhǎng)度量值之中。因此在長(zhǎng)度測(cè)量時(shí)采用重疊對(duì)線法。就是把米字線的虛線正好和輪廓影像邊緣重疊,使虛線的一半在輪廓影像之內(nèi),另一半在影像之外。對(duì)線時(shí)應(yīng)以米字線虛線的中央為準(zhǔn),而以其延長(zhǎng)部分為參考,工具顯微鏡可獲得準(zhǔn)確的測(cè)量結(jié)果。
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